Guanidine thiocyanate 593-84-0 memudahkan pengambilan nukleotida dan peptida dari visera haiwan

Guanidine tiosianat | 593-84-0 | adalah denaturan protein yang kuat. Ia adalah serbuk kristal putih, merengsa dan sensitif kepada cahaya. Ia larut dalam etanol dan air, dengan takat lebur 118℃. Guanidine thiocyanate digunakan terutamanya untuk denaturasi, lisis sel dan pengekstrakan RNA dan DNA. Ini adalah komponen kimia yang biasa untuk pengambilan asid nukleik.

Paten cn111500664a mendedahkan kaedah untuk mengekstrak nukleotida dan polipeptida daripada visera haiwan menggunakan guanidine tiosianat. Nukleotida ialah sebatian yang terdiri daripada asas purin atau asas pirimidin, ribosa atau deoksiribosa dan asid fosforik, yang digunakan secara meluas dalam perubatan, produk ibu dan anak, perasa dan bahan tambahan makanan. Polipeptida ialah α- Sebatian yang dibentuk oleh asid amino yang dihubungkan bersama oleh ikatan peptida adalah produk perantaraan hidrolisis protein, yang melibatkan pelbagai bidang hormon manusia, saraf, pertumbuhan sel dan pembiakan. Kepentingan mereka terletak dalam mengawal selia fungsi fisiologi pelbagai sistem dan sel dalam badan, mengaktifkan enzim yang berkaitan dalam badan, menggalakkan kebolehtelapan membran metabolik perantaraan, atau mengawal transkripsi DNA atau menjejaskan sintesis protein tertentu, Akhirnya menghasilkan kesan fisiologi tertentu.

Visera haiwan kaya dengan nukleotida dan peptida, tetapi pada masa ini, pengekstrakan nukleotida dan peptida kebanyakannya dijalankan secara berasingan, mengakibatkan pembaziran sumber dan proses yang kompleks. Guanidine thiocyanate berguna untuk mengekstrak nukleotida dan peptida daripada viscera haiwan. Kaedah khusus adalah seperti berikut:

Pertama, cuci viscera haiwan segar, tiriskan, potong, kemudian tumbuk, tambahkan air deionisasi untuk mendapatkan larutan campuran, kemudian tambahkan larutan tiosianat guanidine ke dalam larutan campuran, getar dan gaul rata, dan kemudian berdiri. Kemudian, pembawa yang mengandung silika ditambahkan ke dalamnya, kerana guanidine thioscyanate akan membelah sel, dan nukleotida yang dilepaskan dari sel akan digabungkan dengan pembawa silika. Keluarkan pembawa yang mengandungi silika, serap dan pisahkan dengan eluen untuk mendapatkan nukleotida yang disucikan.

Kemudian, larutan NaCl ditambah kepada larutan baki dari mana pembawa silika telah dikeluarkan, larutan campuran diekstrak, kemudian protease komposit ditambah, kemudian hidrolisis enzimatik gelombang mikro dijalankan, larutan hidrolisis enzimatik dipanaskan dalam mandi air , disentrifugasi, supernatan diambil, dan polipeptida diperoleh selepas pengeringan beku.

Kaedah ini menggunakan ciri-ciri bahawa guanidine tiosianat boleh memusnahkan struktur sel dan menyahtukarkan protein. Ia bukan sahaja boleh mengekstrak nukleotida dan peptida berturut-turut, tetapi juga mempunyai kelebihan kaedah mudah dan kecekapan tinggi. Pada masa yang sama, ia juga mengelakkan masalah tindak balas antara reagen biokimia apabila menambah reagen biokimia untuk pengekstrakan.